期刊简介
本刊2001年12月创刊。由卫生部主管、中国医学科学院主办，阜外心血管病医院承办，是以基础与临床相结合为特点的分子心血管病专业学术期刊。自创刊以来，期刊质量不断提高，先后被中国科学技术信息研究所万方数据库、中国学术期刊全文数据库（CNKI）、重庆维普资讯数据库等收录。2006年起被万方数据库的《中国科技核心期刊数据库》收录。
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首页>中国分子心脏病学杂志
- 杂志名称：中国分子心脏病学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国医学科学院；中国协和医学院
- 国际刊号：1671-6272
- 国内刊号：11-4726/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
人抗地高辛单链抗体在大肠杆菌的表达
刘德新；李小鹰；陈瑞晗；郝好杰；王琰
关键词：单链抗体, 地高辛, 中毒
摘要：目的:研究人抗地高辛(Dig)单链抗体(ADAscFv)在大肠杆菌(E.coli)的表达及包涵体变性和复性条件.方法:(1)用PCR扩增人ADAscFv基因,重组于克隆载体pGEM-T,NdeI+SalI消化回收目的基因,插入pT7.7载体构建表达载体pT-ADAscFv,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白的表达情况,筛选高表达克隆;(2)提取纯化包涵体,SDS-PAGE分析其纯度,采用不同的方法及条件进行变性及复性,ELISA检测活性.结果:(1)SDS-PAGE显示,含有重组质粒pT-ADAscFv的E.coli菌株BL21(DE3)的表达产物中有一条约30kD的条带,其分子量与预期值相符,提取纯化的包涵体的纯度较高;(2)ELISA显示,透析复性法和稀释复性法均可使其复性.结论成功地构建了人ADAscFv表达载体,实现了其在E.coli的表达并对其包涵体变性、复性条件进行了研究,为制备适于临床上诊断及治疗Dig中毒的人源性单抗奠定了基础.
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