期刊简介
本刊2001年12月创刊。由卫生部主管、中国医学科学院主办，阜外心血管病医院承办，是以基础与临床相结合为特点的分子心血管病专业学术期刊。自创刊以来，期刊质量不断提高，先后被中国科学技术信息研究所万方数据库、中国学术期刊全文数据库（CNKI）、重庆维普资讯数据库等收录。2006年起被万方数据库的《中国科技核心期刊数据库》收录。
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首页>中国分子心脏病学杂志
- 杂志名称：中国分子心脏病学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国医学科学院；中国协和医学院
- 国际刊号：1671-6272
- 国内刊号：11-4726/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
人Angiopoietin-2剪接体Ang2443的快速克隆及高效表达
蔡明清；张惠丽；黄赞春；张宇；叶珏；惠汝太
关键词：Angiopoietin-2, 剪接体, 融合蛋白, 凝血酶, 血管发生
摘要：目的构建Angiopoietin-2剪接体Ang2443全长及功能结构域(CC区和FL区)的原核和真核表达质粒,并在大肠杆菌内获得高产量表达.方法利用RT-PCR方法从人脐静脉内皮细胞中扩增获得Ang2443功能结构域CC区和FL区,以剪接扩增PCR克隆全长片段,亚克隆至pET-32b(-)载体,IPTG诱导获得融合蛋白表达.凝血酶酶切后经柱层析纯化获得完全蛋白.结果在所培养的人脐静脉内皮细胞中,Ang2443是唯一表达的剪接体.以此构建了pET-CC、pET-FL和pET-Ang2三个原核和真核表达载体,并在大肠杆菌内获得高产量表达.1mM IPTG诱导表达后蛋白产量60%.凝血酶酶切完全,经柱层析纯化后获得完全蛋白.结论成功克隆并表达了在所培养的人脐静脉内皮细胞中唯一表达的Angiopoietin-2剪接体Ang2443全长及功能结构域蛋白.
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