不同方式七氟醚缺血处理对大鼠离体心脏缺血-再灌注损伤的保护作用的比较

摘要：目的 比较七氟醚缺血预处理、七氟醚缺血后处理及七氟醚缺血预处理联合七氟醚缺血后处理3种方式对大鼠离体心脏缺血-再灌注损伤保护效果及相关机制.方法 大鼠心脏离体平衡期灌注10 min后随机分为4组:对照(CTRL)组,全心缺血30 min随后复灌120 min,无其它干预;七氟醚缺血预处理(SpreC)组:以3％七氟醚行缺血预处理15 min,洗出10 min,后全心缺血30 min复灌120 min;七氟醚后处理(SpostC)组:全心缺血30 min,随后复灌60 min,复灌初15 min行3％七氟醚缺血后处理;SpreC+SpostC组:联合使用SpreC和SpostC.比较组内不同时点及组间相同时点的血流动力学.所有实验组行组内不同时点和组间同时点的血流动力学比较及左室梗死面积比较.为评价七氟烷处理对心肌损伤的保护作用,平衡期和复灌120 min两个时点取各组冠脉流出液,测定乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CK-MB).比较各组蛋白激酶B(PKB/Akt)和细胞外信号调节激酶1/2(ERK 1/2)磷酸化水平的动态变化情况及缺血后复灌15 min时心肌烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)含量以反映线粒体膜通透转换孔(mPTP)的开放程度.结果 与CTRL组比较,七氟烷处理,即SpreC组、SpostC组和SpreC+SpostC组心脏功能改善(表现为LVDP、+dp/dt、-dp/dt、CF、HR的增加和LVEDP的降低)、梗死面积减小、LDH及CK-MB水平降低(P＜0.05).然而,SpreC组、SpostC组和SpreC+SpostC组三组间比较后发现,SpreC和SpostC的心肌保护效果无差别(P＞0.05),但SpreC+SpostC的心肌保护效果优于单纯SpreC或S postC(P＜0.05).缺血再灌注后,CTRL组心脏PKB/Akt和ERK-1/2磷酸化较基础水平增强(P＜0.05). SpreC和SpreC+SpostC均可分别导致预处理期和缺血后复灌期的“双时相”的PKB/Akt、ERK-1/2磷酸化(P＜0.05). SpostC仅能导致缺血后七氟烷后处理期的“单时相”的PKB/Akt、ERK-1/2磷酸化(P＜0.05).SpreC+SpostC组心脏复灌15min及120min时的PKB/Akt、ERK-1/2磷酸化均高于对应时点的SpreC组及SpostC组心脏(P＜0.05).CTRL组心脏的NAD+含量低于其它3组(P＜0.05).SpreC+SpostC组心脏NAD+含量高于SpreC或SpostC组(P＜0.05),提示SpreC和SpostC联合使用时,对缺血再灌注导致的mPTP开放的抑制作用进一步增强.结论 SpreC和SpostC能为离体心脏的MIRI提供程度相近的保护作用,表现为心功能的恢复、梗死面积、和心肌酶释放、信号转导关键酶的激活程度及对mPTP开放的抑制.SpreC和SpostC联合实施时,上述保护作用可叠加.